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梅里埃API Listeria 试剂盒使用全攻略:操作步骤、结果判读与注意事项

发表时间:2025-09-01

梅里埃/10300/李斯特氏菌属鉴定试剂盒(比色法API Listeria) 河南岱正商贸优势供应 订购详询!

梅里埃(bioMérieux)API Listeria 试剂盒是专用于李斯特氏菌属(Listeria spp.)生化鉴定的经典工具,广泛应用于食品、临床及环境样本中可疑菌落的确认。正确使用该试剂盒,是确保鉴定结果准确可靠的关键。


一、操作步骤

1.菌株准备:选取纯培养的单个可疑菌落(通常为革兰氏阳性短杆菌,过氧化氢酶阳性),用0.85%生理盐水或API Suspension Medium调整菌悬液浊度至麦氏2-3号标准(约10的8次方CFU/mL)。

2.接种:用无菌吸管将菌悬液注入试剂条的13个生化小孔中,确保每个小孔液面充满且无气泡。注意第7孔(L-鼠李糖)需加入一滴矿物油以创造厌氧环境。

3.培养:将接种好的试剂条置于35±2°C恒温培养箱中,有氧培养24-48小时。

4.加试剂:培养结束后,按说明书要求向指定孔(如VPINDURE等)加入相应的显色试剂(如VP A/BINDURE试剂)。


二、结果判读

1.观察反应:加入试剂后5-15分钟内观察各孔颜色变化,根据说明书比色卡判读阴阳性(如葡萄糖发酵产酸为黄色,VP反应阳性为红色)。

2.获取编码:将13个生化反应结果(阳性记为1,阴性记为0)按顺序组合成一个7位数字编码。

3.查询数据库:使用梅里埃提供的API® WEB数据库或鉴定手册,输入编码,系统将给出最可能的菌种鉴定结果及鉴定概率(ID%)。常见目标菌为单核细胞增生李斯特氏菌(L. monocytogenes)或英诺克李斯特氏菌(L. innocua)。


三、注意事项

严格无菌操作,避免污染。

菌悬液浓度必须准确,过高或过低均影响结果。

确保矿物油覆盖到位,保证厌氧反应环境。

显色试剂需新鲜配制,避光保存,按要求添加。

结果应在规定时间内判读,避免延迟导致假阳性。

对于低概率或可疑结果,建议结合其他方法(如血清学、PCR)进行确认。


遵循以上流程,可充分发挥API Listeria试剂盒的鉴定效能,为李斯特氏菌的精准溯源提供有力支持。

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